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CRP基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建和表達(dá)及其免疫原性檢測
采用大腸桿菌表達(dá)體系來獲得C-反應(yīng)蛋白(CRP)融合蛋白.以pDNR-CRP質(zhì)粒為模板,用PCR方法擴(kuò)增獲得全長的CRP基因,將其克隆入表達(dá)載體pET28a(+)中,再轉(zhuǎn)化到宿主菌BL21(DE3)中,加入IPTG誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物做SDS-PAGE電泳分析,最后做免疫原性檢測.成功地構(gòu)建了CRP基因原核表達(dá)載體pET28a(+)-CRP,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)SDS-PAGE電泳分析表明C-反應(yīng)蛋白能在大腸桿菌中獲得表達(dá),但免疫原性檢測初步結(jié)果為陰性.結(jié)果證明CRP能以融合蛋白的形式在宿主菌BL21(DE3)中得到大量表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物缺乏免疫原性,其機(jī)理還有待進(jìn)一步試驗探討.
作 者： 余云芳 姚偉 張昌菊 魯林 何正權(quán) 樂超銀 梁宏偉 YU Yun-fang YAO Wei ZHANG Chang-ju LU Lin HE Zheng-quan YUE Chao-yin LIANG Hong-wei 作者單位： 余云芳,YU Yun-fang(三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002;三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院,宜昌,443002)姚偉,YAO Wei(三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002;福建農(nóng)林大學(xué),農(nóng)業(yè)部甘蔗生理生態(tài)與遺傳改良重點開放實驗室,福州,350002)
張昌菊,ZHANG Chang-ju(三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院,宜昌,443002)
魯林,何正權(quán),樂超銀,梁宏偉,LU Lin,HE Zheng-quan,YUE Chao-yin,LIANG Hong-wei(三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002)
刊 名： 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS(NATURAL SCIENCES EDITION) 年，卷(期)： 2006 28(2) 分類號： Q786 關(guān)鍵詞： C反應(yīng)蛋白 原核表達(dá) IPTG 免疫原性【CRP基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建和表達(dá)及其免疫原性檢測】相關(guān)文章：
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