DAB389-Linker-LHRH重組毒素的構(gòu)建及生物活性的初步測(cè)定

采用基因工程方法,將白喉毒素的毒性部分(DAB389)通過柔性連接肽(Linker)與促黃體激素釋放素(LHRH)基因連接起來,克隆到高效表達(dá)載體pET28a(+)中,并在大腸桿菌中表達(dá)該融合蛋白(DAB389-Linker-LHRH).通過三步層析純化目的蛋白,獲得了純度達(dá)95%的重組毒素DAB389-Linker-LHRH.用MTT法檢測(cè)其對(duì)過度表達(dá)LHRH受體的人宮頸癌HeLa細(xì)胞的毒性作用,探討其對(duì)HeLa細(xì)胞的特異殺傷情況.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示DAB389-Linker-LHRH對(duì)HeLa細(xì)胞具有很強(qiáng)的生長抑制作用,其IC50為12.93 μg/ mL.表明該免疫重組毒素在體外對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞具有明顯的殺傷作用,為進(jìn)一步研制對(duì)宮頸癌有特異治療作用的靶向抗癌藥物奠定了基礎(chǔ).

作 者： 岳玉環(huán) 張國利 吳廣謀 何暢 朱平 YUE Yu-huan ZHANG Guo-li WU Guang-mou HE Chang ZHU Ping   作者單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所,吉林,長春,130062  刊 名： 東北師大學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NORTHEAST NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 38(2)  分類號(hào)： Q784  關(guān)鍵詞： 白喉毒素   促黃體激素釋放素   重組毒素   生物活性  

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