用于篩選COPS3相互作用蛋白酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7-COPS3的構(gòu)建及鑒定

目的 用COP島基因片段構(gòu)建酵母雙雜交GAL4系統(tǒng)的誘餌載體pGBKT7-COPS3,并檢測其表達(dá)產(chǎn)物對酵母細(xì)胞有無毒性及對報(bào)告基因有無激活作用.方法 運(yùn)用RT-PCR技術(shù)從骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607中擴(kuò)增出COPS3基因片段,克隆入pUC19質(zhì)粒,經(jīng)測序正確后,插入酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7中,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌AH109,檢測其表達(dá)產(chǎn)物在酵母細(xì)胞中對報(bào)告基因有無激活作用.結(jié)果 成功獲得COPS3基因片段,其表達(dá)蛋白對酵母菌AH109無毒性,對報(bào)告基因亦無激活作用.結(jié)論 可以利用酵母雙雜交GAL4系統(tǒng)來研究與COPS3相互作用蛋白.

作 者： 蘇海川 趙玉紅 陳軍 張偉 李陜區(qū)   作者單位： 蘇海川,陳軍,李陜區(qū)(第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室,西安,710038)

趙玉紅(第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室)

張偉(第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室) 

刊 名： 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2007 38(7)  分類號： Q781  關(guān)鍵詞： 基因,COPS3   酵母雙雜交系統(tǒng)   報(bào)告基因  

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