八肋游仆蟲γ微管蛋白cDNA序列及其在大腸桿菌中的表達

提取八肋游仆蟲(Euplotes octocarinatus)的mRNA,采用RT-PCR技術(shù)對其γ微管蛋白基因的cDNA序列進行了分析.結(jié)果表明八肋游仆蟲的微管蛋白編碼基因至少使用4個轉(zhuǎn)錄起始位點, 分別位于起始密碼子前的32、29、24和20bp處;該基因同時也有至少4多聚腺苷酸加尾位點,分別位于終止密碼子后的21、23、29和32 bp處.由于多個轉(zhuǎn)錄起始位點和多聚腺苷酸加尾位點的存在,對應(yīng)的mRNA長度在1427～1450 核苷酸之間.此外,本研究對該基因中編碼半胱氨酸的TGA密碼子進行定點突變,然后在大腸桿菌中進行異體表達, SDS-PAGE分析表明表達產(chǎn)物為92kDa的γ微管蛋白融合蛋白.

作 者： 譚明 梁愛華 Tan Ming Liang Aihua   作者單位： 譚明,Tan Ming(中山大學(xué)生物系,廣州,510275)

梁愛華,Liang Aihua(山西大學(xué)生物工程室,太原,030006) 

刊 名： 高技術(shù)通訊  ISTIC EI PKU 英文刊名： HIGH TECHNOLOGY LETTERS  年，卷(期)： 2000 10(4)  分類號： Q3  關(guān)鍵詞： 纖毛蟲   游仆蟲   融合表達   轉(zhuǎn)錄起始位點   加多聚腺苷酸位點  

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