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SHV-12型超廣譜β-內(nèi)酰胺酶特性的研究
目的研究SHV-12型超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBL)的特性.方法將blaSHV-12基因連接至pET28a載體上,并用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21進(jìn)行克隆表達(dá),挑選blaSHV-12陽(yáng)性表達(dá)的菌落,提取其酶蛋白進(jìn)行等電點(diǎn)測(cè)定和酶動(dòng)力學(xué)分析.結(jié)果SHV-12型ESBL等電點(diǎn)為8.2.同時(shí),在所測(cè)的幾種抗生素中,該酶對(duì)頭孢他啶和頭孢噻肟的Km相同且最小;對(duì)頭孢噻吩,有著最大的Vmax/Km;而對(duì)阿莫西林,表現(xiàn)出最大的Km和最低的Vmax.結(jié)論SHV-12型ESBL對(duì)頭孢他啶和頭孢噻肟具有高的親和力,而對(duì)頭孢噻吩有最大的催化效能.
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