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應用載體介導的RNAi技術抑制胰腺癌細胞K-RASAsn12的表達
為了研究載體介導的RNAi(RNA interference)技術特異地抑制K-RASAsn12(K-RAS第12位密碼子突變形式為GAT)在胰腺癌細胞中的表達,合成兩條編碼針對K-RASAsn12突變特異性短發(fā)夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的單鏈DNA,并將其克隆到pSilenCircle載體中,構建含目的基因片段的重組質粒pSC-K-RASAsn12.同法構建含GFP基因片斷的重組質粒pSC-GFP做為對照.用其分別瞬時轉染人胰腺癌AsPC-1細胞和BxPC-3細胞后,經(jīng)半定量RT-PCR和Western blot檢測K-RAS的表達水平.結果表明構建的針對K-RASAsn12的編碼突變特異性shRNA的質粒表達載體可特異的抑制胰腺癌細胞的K-RASAsn12表達,但對野生型的K-RAS(K-RASWT)表達無影響.
作 者： 孟繁杰 付澤嫻 張峰 李保東 謝紹建 蔡建輝 MENG Fan-jie FU Ze-xian ZHANG Feng LI Bao-dong XIE Shao-jian CAI Jian-hui 作者單位： 河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院外科外科研究中心,石家莊,050000 刊 名： 中國生物工程雜志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(4) 分類號： Q752 關鍵詞： 胰腺癌K-RAS RNAi 短發(fā)夾RNA【應用載體介導的RNAi技術抑制胰腺癌細胞K-RASAsn12的表達】相關文章：
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