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MST1的酵母雙雜交及與Salvador體外結(jié)合的研究
利用酵母雙雜交系統(tǒng),以鼠MST1(Mammalian STE20-like 1)為誘餌蛋白,在鼠胚胎庫中篩選到22個Salvador的片段.通過E.coli表達(dá)系統(tǒng)純化了6個組氨酸(6His)融合的MST1和谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)融合的Salvador,并做體外蛋白質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步證實(shí)了兩蛋白質(zhì)相互結(jié)合.通過體外激酶活性分析,發(fā)現(xiàn)MST1并不直接磷酸化Salvador,但是Salvador能夠較強(qiáng)地抑制MST1對MBP(磷酸丁酯)的磷酸化,提示有可能Salvador通過影響MST1的激酶活性來參與了MST1介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑.
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