膽固醇氧化酶基因的克隆及在E.coli中的表達

根據(jù)NCBI中報道的Brevibacterium sterolicum ATCC21387膽固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacterium sp.DGCDC-82的基因組為模板,擴增得到了編碼膽固醇氧化酶的基因,該基因與來源于Brevibacterium sterolicum ATCC21387的膽固醇氧化酶基因(choB)同源性為98%.將得到的基因定向克隆到pET28a載體中,轉(zhuǎn)化至含有編碼argU和proL基因的大腸桿菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中表達.經(jīng)過IPTG誘導后,經(jīng)SDS-PAGE檢測在約55kD處有一蛋白表達條帶,目的蛋白表達量約占總蛋白的16%,經(jīng)測定酶活為340U/L.

作 者： 王龍剛 鄔敏辰 王武 WANG Long-Gang WU Min-Chen WANG Wu   作者單位： 江南大學工業(yè)生物技術教育部重點實驗室,無錫,214036  刊 名： 微生物學通報  ISTIC PKU 英文刊名： MICROBIOLOGY  年，卷(期)： 2006 33(6)  分類號： Q93  關鍵詞： Brevibacterium sp.DGCDC-82   膽固醇氧化酶   克隆   原核表達  

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