根據(jù)R基因保守區(qū)分離小麥R基因類(lèi)似序列

用根據(jù)核苷酸結(jié)合位點(diǎn)(nucleotide binding site, NBS)和絲氨酸/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶域設(shè)計(jì)的2對(duì)簡(jiǎn)并性引物,以小麥-簇毛麥6VS/6AL易位系的cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增.擴(kuò)增產(chǎn)物克隆到pGEM-T載體中,經(jīng)測(cè)序,共獲得具有NBS結(jié)構(gòu)域特征的片段克隆9個(gè)和具有絲氨酸/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶域特征的片段的克隆1個(gè).將克隆之間核苷酸序列同源性高于90%的克隆歸為一類(lèi),把9個(gè)NBS片段分為6類(lèi).這6類(lèi)抗病基因類(lèi)似序列(resistance gene analogs, RGA)均具有閱讀框,并與已克隆的小麥抗條銹病基因Yr10、大麥抗白粉病基因Mla1和Mla6、擬南芥的抗病基因RPS2以及其他一些抗病基因在NBS保守區(qū)內(nèi)具有高度的同源性.用小麥中國(guó)春缺體-四體初步將它們分別定位于小麥第一、第二和第五部分同源群上.進(jìn)一步用5′-RACE技術(shù)獲得RGA N5的5′-端,發(fā)現(xiàn)其編碼產(chǎn)物的N端還具有6個(gè)亮氨酸拉鏈(leucine zipper, LZ),與RPS2的N-端有較高同源性.

作 者： 秦跟基 陳佩度 顧紅雅 馮袆高 牛吉山 QIN Gen-Ji CHEN Pei-du GU Hong-Ya FENG Yi-Gao NIU Ji-Shan   作者單位： 秦跟基,QIN Gen-Ji(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部作物細(xì)胞遺傳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京,210095;北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,蛋白質(zhì)工程及基因工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京,100871)

陳佩度,馮袆高,牛吉山,CHEN Pei-du,FENG Yi-Gao,NIU Ji-Shan(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部作物細(xì)胞遺傳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京,210095)

顧紅雅,GU Hong-Ya(北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,蛋白質(zhì)工程及基因工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京,100871) 

刊 名： 植物學(xué)報(bào)  ISTIC SCI 英文刊名： ACTA BOTANICA SINICA  年，卷(期)： 2003 45(3)  分類(lèi)號(hào)： Q943.2  關(guān)鍵詞： R基因類(lèi)似片段   核苷酸結(jié)合位點(diǎn)   PCR   小麥-簇毛麥6VS/6AL易位系   resistance gene analogs   nucleotide-binding site   PCR   Triticum aestivum-Haynaldia villosa translocation line  

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