一種產(chǎn)鄰苯二酚菌株高通量篩選方法

目的:對產(chǎn)鄰苯二酚菌株進(jìn)行篩選.方法:采用前期篩得的產(chǎn)鄰苯二酚菌為出發(fā)菌株,通過硫酸二乙酯誘變的方法使該菌株突變,同時(shí)建立96孔板培養(yǎng)和酶標(biāo)儀檢測方法對產(chǎn)鄰苯二酚菌株進(jìn)行高通量篩選.結(jié)果:硫酸二乙酯的終濃度為0.1%,誘變時(shí)間為8 min的條件下,突變菌致死率為84.5%,突變效果最好.篩選培養(yǎng)基中吸光值(495nm)和富集培養(yǎng)基中菌液濁度值(OD_(630))的加和值較大的突變菌株產(chǎn)鄰苯二酚能力高.通過誘變和篩選得到的菌株,產(chǎn)鄰苯二酚濃度可達(dá)0.87mg/ml,比出發(fā)菌株的提高了262.5%.經(jīng)過形態(tài)學(xué)和生理生化反應(yīng),初步鑒定該菌株屬于假單胞菌屬(Pseudomonas sp.).結(jié)論:硫酸二乙酯誘變和96孔板篩選的方法能以高通量方式快速篩選出產(chǎn)鄰苯二酚菌株.

作 者： 王永澤 李亨芬 王金華 陳雄 李冬生 周寶晗 WANG Yong-ze LI Heng-fen WANG Jin-hua CHEN Xiong U Dong-sheng ZHOU Bao-han   作者單位： 王永澤,王金華,陳雄,李冬生,WANG Yong-ze,WANG Jin-hua,CHEN Xiong,U Dong-sheng(湖北工業(yè)大學(xué),發(fā)酵工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北武漢,430068)

李亨芬,LI Heng-fen(湖北工業(yè)大學(xué),發(fā)酵工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北武漢,430068;華僑大學(xué)分子藥物學(xué)研究所,福建泉州,362021)

周寶晗,ZHOU Bao-han(湖北工業(yè)大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院,湖北武漢,430068) 

刊 名： 生物技術(shù)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2009 19(6)  分類號(hào)： O815  關(guān)鍵詞： 鄰苯二酚   高通量篩選   化學(xué)誘變   catechol   high throughput screen   chemical mutation  

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