截短型細(xì)胞毒素Gelonin的分子構(gòu)象和生物活性

為了探索免疫絡(luò)合物中具殺傷靶細(xì)胞的毒素,gelonin的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,根據(jù)化學(xué)合成的gelonin基因序列和3維分子構(gòu)象設(shè)計(jì)了N端區(qū)Gly,Leu,Asp和/或C端區(qū)Asp,Lys,Asp,Pro,Lys缺失的gelonin.以重組質(zhì)粒pE-gel為模板,在相應(yīng)引物存在下,用PCR法獲得5'端區(qū)和/或3'端區(qū)堿基序列缺失的gelonin基因片段.經(jīng)克隆、表達(dá)和純化得到3種截短型gelonin(G-N3、G-C5、G-N3C5).CD譜和熒光譜表明,完整型gelonin(G-O)與截短型gelonin的分子構(gòu)象有明顯的差異.它們的構(gòu)象變化與類(lèi)DNase活性和抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的能力均為G-O≥G-N3＞G-C5＞G-N3C5.結(jié)果再一次證明了具有α+β型結(jié)構(gòu)蛋白,gelonin的構(gòu)象與生物活性的一致性.

作 者： 蘧艷峰 李卓玉 郭晨云 郭素堂 史天良 袁靜明 QU Yan-Feng LI Zhuo-Yu GUO Chen-Yun GUO Su-Tang SHI Tian-Liang YUAN Jing-Ming   作者單位： 蘧艷峰,李卓玉,袁靜明,QU Yan-Feng,LI Zhuo-Yu,YUAN Jing-Ming(教育部化學(xué)生物學(xué)與分子工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,生物技術(shù)研究所,山西大學(xué),太原,030006)

郭晨云,GUO Chen-Yun(中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所,上海,201203)

郭素堂,史天良,GUO Su-Tang,SHI Tian-Liang(山西省腫瘤研究所,太原,030013) 

刊 名： 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(5)  分類(lèi)號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 截短型gelonin   純化   構(gòu)象   類(lèi)DNase活性   腫瘤細(xì)胞抑制  

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