鯊肝刺激物類似物sHSA原核表達載體質粒穩(wěn)定性的考察

研究原核表達載體pET-sHSA基因工程菌株傳代50代過程中菌種的穩(wěn)定性.采用LB液體培養(yǎng)基傳代的方法考察了傳代對菌種穩(wěn)定性的影響.以菌體和菌落的形態(tài)、質粒穩(wěn)定性(ST)、質粒酶切圖譜及表達量等方面進行考察,以評價工程菌的穩(wěn)定性.結果表明:pET-sHSA工程菌株在傳代50代過程中具有較高的質粒穩(wěn)定性.傳代10代內(nèi)質粒穩(wěn)定性(ST)高達97%,傳50代后質粒穩(wěn)定性(ST)為82%.且重組產(chǎn)物表達量保持穩(wěn)定,表達產(chǎn)物可達發(fā)酵液可溶性蛋白總量的40%,由此證明了表達載體pET-sHSA工程菌株具有傳代穩(wěn)定性,適合工業(yè)化生產(chǎn).

作 者： 趙艷景 王穎 ZHAO Yan-jing WANG Ying   作者單位： 趙艷景,ZHAO Yan-jing(淮海工學院海洋生物技術重點建設實驗室,江蘇,連云港,222005)

王穎,WANG Ying(中國藥科大學生命科學與技術學院,江蘇,南京,210009) 

刊 名： 藥物生物技術  ISTIC 英文刊名： PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 15(3)  分類號： Q51 Q81  關鍵詞： pET-sHSA   質粒穩(wěn)定性   工程菌穩(wěn)定性  

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